Q Cromatografia de membrana d'anions forts

 

2. Avantatges del producte

2.1 Ràpid i eficient - aconsegueix una gran capacitat d'unió a cabals fins a 40 vegades més ràpid que les resines tradicionals. En comparació amb la cromatografia de llit compactat-, el temps de procés mitjançant la cromatografia de membrana es redueix de 30 a 40 vegades. El cabal de funcionament típic és de 10 MV/min.

2.2 La cromatografia de membrana - d'alta eficiència d'unió presenta una gran capacitat de càrrega i uns cabals elevats en condicions de baixa caiguda de pressió, cosa que permet capturar biomolècules carregades en una sola passada.

2.3 Escalable i flexible - La sèrie completa de productes de cromatografia de membrana pot satisfer les diverses necessitats de purificació de biomacromolècules, abastant totes les etapes des del desenvolupament del procés fins a la producció a gran-escala. El disseny estructural del tipus-càpsula admet tant el funcionament d'un sol-ús com la reutilització després de la neteja.

2.4 Millorar la productivitat - El disseny compacte minimitza l'empremta de les instal·lacions. En eliminar les operacions d'embalatge, neteja, validació de neteja i emmagatzematge de columnes, el procés requereix menys tampó per a l'equilibri i es pot realitzar directament sense preparació de la columna. Els costos laborals es poden reduir fins a un 50%.

 

3. Paràmetre tècnic

3.1 Material estructural

	Escala de laboratori	petita escala	escala pilot	escala de producció
volum de membrana	0,2 ml	5 ml	140 ml	5L
Estructura de suport de la membrana:	polipropilè (PP)
carcassa de membrana	polipropilè (PP)
Anell O	silicona

 

3.2 Característiques de funcionament

	Escala de laboratori	petita escala	escala pilot	escala de producció
volum de membrana	0,2 ml	5 ml	400 ml	5L
Caudal recomanat	1-6 ml/min	25-150 ml/min	2-12 l/min	25-150 l/min
Temperatura màxima de funcionament	35 graus
Pressió màxima de funcionament	3 bar (25 graus)
Màxim diferencial de pressió	3 bar (25 graus)
Condicions d'emmagatzematge:	Solució aquosa d'etanol al 20%.

 

La vida útil de la cromatografia de membrana Q és comparable a la de la cromatografia en gel d'agarosa.

 

 

Figura 1. Canvis en la capacitat de càrrega de la cromatografia de membrana després de múltiples usos supervisats per BSA

A més, es va avaluar l'eficiència d'eliminació de la cromatografia de membrana per a les proteïnes de la cèl·lula hoste i els àcids nucleics. Els resultats són els següents.

	ADN				HCP
	Recuperació d'IgG	Contingut (pg/mg d'IgG) per RT PCR		Factor d'eliminació	Contingut (ng/mg d'IgG) per Elisa		Factor d'eliminació
Corre	%	Abans de la membrana Q	Després de la membrana Q	Registre	Abans de la membrana Q	Després de la membrana Q	Registre
1	96.7	423	1.2	2.55	7	4.8	0.16
2	97.4	438	1.3	2.53	7	4.9	0.15
3	94.7	513	1.3	2.60	6	1.9	0.50
4	95	32	0.9	1.55	6	4.2	0.15
5	96.3	45	1.1	1.61	8	5.2	0.19
6	96.5	158	0.7	2.35	8	6.2	0.11
7	96.4	267	1.9	2.15	9	7.2	0.10
8	96.8	298	2.3	2.11	9	8.2	0.04
9	97.1	746	1.5	2.70	4	2	0.30
10	96.6	39	1	1.59	4	1.5	0.43

Taula 1. Taxes d'eliminació d'ADN i proteïnes de cèl·lules hoste en material IgG expressat amb CHO- mitjançant cromatografia de membrana Q

 

Una sèrie d'experiments van demostrar que la cromatografia de membrana Q pot eliminar eficaçment les impureses mantenint una alta recuperació d'IgG objectiu.

A més, vam comparar la cromatografia de membrana Gudiling amb marques importades i les dades de capacitat de càrrega són les següents:

Capacitat de càrrega (mg/ml)	Sartorius	PALL	Guiar
BSA	29	60	45
SOD	25	40	35
Proteïna A	27	45	40
Tripsina	30	56	44

Taula 2. Rendiment de càrrega de diferents proteïnes en el nostre producte i productes de la competència

L'avaluació global mostra que la nostra capacitat de càrrega és comparable als productes importats,

Figura 2.Utilitzant un mòdul de cromatografia de membrana Q, es va utilitzar BSA com a proteïna estàndard per avaluar la capacitat d'unió. La capacitat d'enquadernació dinàmica es va comparar amb la dels productes importats. Els resultats van mostrar que la major part de la proteïna objectiu es podia capturar i eluir amb ella150 mM de NaClquan s'utilitza BSA com a proteïna model.

A través de diferents condicions d'elució, vam trobar que el comportament d'elució de la cromatografia de membrana és similar al de la cromatografia en gel d'agarosa. La puresa de les proteïnes eluïdes a diferents concentracions de sal varia significativament. En el desenvolupament i la producció de processos reals, és necessari determinar quantitativament les condicions òptimes d'elució per tal d'obtenir la proteïna objectiu amb una puresa elevada.

 

4. Cas d'aplicació típic

Eliminació d'ADN, virus, proteïnes de cèl·lules hoste (HCP) i endotoxines

Captura de plasmidis, virus i proteïnes, així com purificació d'oligonucleòtids

 

5. Procediment de funcionament

5.1: Preparació i muntatge d'equips:

5.1.1:Sistema de cromatografia AKTA: instal·leu el mòdul de cromatografia de membrana d'una manera similar a les columnes empaquetades. Assegureu-vos que la direcció de la fletxa del mòdul sigui coherent amb la direcció del flux d'alimentació. Connecteu el sistema mitjançant connectors Luer o accessoris Tri-Clamp.

5.1.2 Establiu el cabal d'entrada a 5-10 MV/min i utilitzeu el tampó d'equilibri per eliminar l'aire del sistema. Després d'assegurar-vos que no hi ha bombolles d'aire al corrent de sortida, connecteu la sortida del permeat al sistema de cromatografia.

5.2: Tractament pre-ús:

5.2.1:

Set the inlet flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with 0.5 M NaOH at >5 MV per garantir que la membrana arribi a l'equilibri.

5.2.2:

At the same flow rate, perform pre-treatment with 1 M NaCl at >5 MV per garantir que la membrana arribi a l'equilibri.

5.3 Procés de cromatografia

5.3.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with equilibration buffer at >5 MV fins que la membrana arribi a l'equilibri.

5.3.2 Després de filtrar prèviament la mostra a través d'un filtre de 0,22 μm, carregueu-la a la columna fins que s'apliqui tota la mostra o s'assoleixi la capacitat d'unió de la cromatografia.

5.3.3 Flush with equilibration buffer at >10 MV fins que el senyal UV cau a la línia de base.

5.3.4 Realitzar l'elució en gradient o lineal segons el protocol dissenyat, i recollir les fraccions segons sigui necessari.

5.4 Tractament post-ús CIP: dispositiu de cromatografia de membrana CIP

5.4.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and treat with 1 M NaOH at >10 MV fins que el senyal UV cau per sota de la línia de base.

5.4.2 Després de circular durant 30 minuts, canvieu al rentat amb aigua fins que el pH arribi a 7-8, després canvieu a etanol al 20% i continueu rentant fins que la conductivitat s'estabilitzi.

5.5, Emmagatzematge de cromatografia de membrana:

Després d'utilitzar i completar el CIP, el mòdul de membrana es pot desmuntar i emmagatzemar en etanol al 20% o mantenir-se en línia a temperatura ambient en etanol al 20%. La solució d'etanol s'ha de substituir i inspeccionar periòdicament.

 

6. Informació de comanda

Q Filtre de càpsula de cromatografia de membrana d'intercanvi d'anions forts-

	Escala de laboratori	petita escala	escala pilot	escala de producció
Model de producte	IEXQ0002ES	IEXQ0050ES	IEXQ0400ES	IEXQ5000ES
volum de membrana	0,2 ml	5 ml	400 ml	5L

Etiquetes populars: q cromatografia de membrana anònica forta, Xina, proveïdors, fabricants, fàbrica, venda a l'engròs, a granel, en estoc, mostra gratuïta